Eurofins MWG Operon fertigt für Sie BAC-Bibliotheken an, überführt Klone in Mikrotiterplatten und spottet diese Klone auf Nylonfilter. Falls kleinere Fragmente benötigt werden, sind unsere Cosmid- oder Fosmidbibliotheken zu empfehlen.
Für Shotgun-Sequenzierungen stellen wir von den Genomen, BACs, PACs, Cosmide oder Plasmide aus mechanisch gescherten Shotgun-Fragmenten her.
BAC-Bibliotheken
- Startmaterial ist schockgefrorenes Gewebe
- Präparation von hochmolekularer DNA
- Generierung der Insert-DNA und Ligation in den Vektor
- Insertgrößen zwischen 80 kb und 200 kb
- Transformation von Wirtszellen
- Picken und Plattieren der benötigten Klonanzahl
- Präparation von Glyzerinkopien der Masterplatte
- Spotten der Nylonfilter für Screening-Experimente
Cosmid- und Fosmidbibliotheken
- Präparation von hochmolekularer DNA, falls gewünscht
- Insertgrößen zwischen 30 kb und 40 kb
- Plattierung der benötigten Klonanzahl
Standard cDNA-Bibliotheken
- Ausgangsmaterial ist Gesamt-RNA oder polyA+-RNA
- Menge der Klone > 1 x 106
- Qualitätskontrolle durch Sequenzierung und BLASTx- Analyse
- Ligationsansatz wird zur Verfügung gestellt
- Transformation und Plattierung auf Anfrage erhältlich
- Volle Länge, normalisierte- und subtrahierte cDNA-Bibliotheken auf Anfrage erhältlich
Shotgun-Bibliotheken aus bakteriellen Genomen
- Präparation von genomischer DNA, falls gewünscht
- Mechanisches Scheren der DNA
- Insertgrößen zwischen 1,5 kb und 3 kb
- Ligationsansatz wird zur Verfügung gestellt
- Transformation und Plattierung auf Anfrage möglich
Shotgun-Bibliotheken aus BAC-, PAC- oder Cosmid-Klonen
- Ausgangsmaterial ist eine Stichkultur des entsprechenden Klons
- Mechanisches Scheren der DNA
- Insertgrößen zwischen 1,5 kb und 3 kb
- Ligationsansatz wird zur Verfügung gestellt
- Transformation und Plattierung auf Anfrage möglich.